Southern Blot印迹杂交

Southern Blot是检测基因组样本中特定DNA序列的一种方法。主要原理是根据碱基互补配对原则，具有一定同源性的两条核酸单链在适宜环境中可杂交形成双链。通过凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的待检DNA分子，转移至尼龙膜或其他固相支撑物上，固定后与标记好的探针进行杂交，利用放射自显影或酶反应显色, 从而检测特定DNA分子的含量。
Southern Blot实验流程

1. 基因组提取:基因组要求完整性好,纯度高

2. 基因组酶切

3. 电泳分离酶切好的DNA样品: 20~40ug/泳道, 25-30V稳压电泳12-24h。

4. 转膜

5. 探针制备

6. 预杂交

7. 杂交

8. 检测