划痕实验检测细胞侵袭、迁移

在现在的科研研究中，最初的研究基本上就是高通量筛选对照组和实验组的差异表达基因，然后进行大样本的荧光定量PCR验证，确定差异基因与某种疾病的相关性。在之后的研究中，我们就要针对差异基因进行干扰或过表达来进行细胞功能实验。其中通过T划痕实验进行细胞侵袭、迁移的检测是比较重要的方法。


细胞划痕是一种简单易行的检测细胞运动的方法，实验成本低，可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。

细胞划痕内容：

材料：6 孔板（其他的也可以，但感觉6孔比较好，大小适中）、marker笔直尺、20微升枪头（灭菌）、无血清培养基、PBS

步骤：所有能灭菌的器械都要灭菌，直尺和marker笔在操作前紫外照射30min（超净台内）

1．先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀得划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。

2．在空中加入约5X105个细胞，具体数量因细胞不同而不同，掌握为过夜能铺满。

3．第二天用枪头比着直尺，尽量垂至于背后的横线划痕，枪头要垂直，不能倾斜。

4．用PBS洗细胞3次，去处划下的细胞，加入无血清培养基。

5．放入37度5%co2培养箱，培养。按0，6，12，24小时取样，拍照。

细胞划痕注意事项：

一般做划痕实验，都是在无血清或者底血清状态下培养的，否则细胞增殖就不能忽略。

按照6孔板背后画线的垂直方向划痕，可以形成若干交叉点，作为固定的检测点，这就解决了前后观察时位置不固定的问题。