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Southern Blot印迹杂交

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Southern Blot是检测基因组样本中特定DNA序列的一种方法。主要原理是根据碱基互补配对原则,具有一定同源性的两条核酸单链在适宜环境中可杂交形成双链。通过凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的待检DNA分子,转移至尼龙膜或其他固相支撑物上,固定后与标记好的探针进行杂交,利用放射自显影或酶反应显色, 从而检测特定DNA分子的含量。
Southern Blot实验流程

  1. 基因组提取:基因组要求完整性好,纯度高

  2. 基因组酶切

  3. 电泳分离酶切好的DNA样品: 20~40ug/泳道, 25-30V稳压电泳12-24h。

  4. 转膜

  5. 探针制备

  6. 预杂交

  7. 杂交

  8. 检测

 




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