最新研究揭示lncRNA如何调控外泌体的分泌过程

大量研究报道外泌体携带lncRNA参与调控肿瘤进程，然而lncRNA是否参与调控外泌体的分泌，还鲜有报道。

今年三月，Dr. Liang Yang等人在杂志《molecular cancer》上发表了一篇题为“Long non-coding RNA HOTAIR promotes exosome secretion by regulating RAB35 and SNAP23 in hepatocellular carcinoma”的文章，揭示了在肝癌发展过程中，长链非编码RNA HOTAIR如何调控外泌体分泌。研究验证了lncRNA HOTAIR在促进肝癌细胞外泌体分泌方面的新功能，并为lncRNA在肿瘤细胞生物学中的应用提供了新的理解。

背景：最新的证据表明肿瘤细胞在肿瘤发生过程中释放大量的载物外泌体。外泌体分泌是一个由某些相关分子调控的多步骤过程。长链非编码RNAs（lncRNA）在肝癌细胞（HCC）发展过程中起了重要作用。然而，lncRNA HOTAIR在调控肝癌细胞外泌体分泌中起到的作用尚不清楚。

方法：本研究使用基因集富集分析法（GSEA）分析HOTAIR表达和外泌体分泌相关基因之间的关系。纳米颗粒追踪分析被用于验证HOTAIR对外泌体分泌的影响。通过透射电镜观察HOTAIR过表达后多泡体(MVBs)的转运，并用共聚焦显微镜对突触体相关蛋白23 (SNAP23)的簇决定子63 (CD63)进行分析。采用共聚焦共定位分析、磷酸化作用分析和解救实验，评估HOTAIR管控Ras相关蛋白质Rab-35（RAB35）、囊泡相关膜蛋白3（VAMP3）和SNAP23的机制，

结果：我们在HOTAIR高表达组中发现了外泌体分泌相关基因的富集。HOTAIR通过诱导MVB转运到质膜促进外泌体的释放。HOTAIR调控RAB35的表达和定位，从而控制对接过程。而且HOTAIR通过影响VAMP3和SNAP23共定位促进融合的最终步骤。此外，我们验证了HOTAIR通过mTOR信号诱导SNAP23磷酸化。      

结论：本研究验证了lncRNA HOTAIR在促进肝癌细胞外泌体分泌方面的新功能，并为lncRNA在肿瘤细胞生物学中的应用提供了新的理解。 

技术路线：                                  

1.HOTAIR的异常表达与外泌体分泌蛋白的相关性

2.验证HOTAIR促进外泌体的分泌

3. HOTAIR增强了MVBs向质膜的转运

4.HOTAIR调控RAB35的表达和定位

5.HOTAIR诱导 VAMP3 与 SNAP23的转运

6.HOTAIR通过磷酸化SNAP23促进外泌体的释放