N6-methyladenosine(M6A)是在真核生物中最普遍的内部信使RNA(mRNA)修饰,并且在转录后调控中扮演关键角色。今年1月19日,南开大学药用化学生物学国家重点实验室和天津医科大学肿瘤研究所的研究人员在JBC Papers in Press上以“MicroRNA-145 Modulates N6-methyladenosine Levels by Targeting the 3′-Untranslated mRNA Region of the N6-methyladenosine–binding YTH Domain Family 2 Protein”为题,报道了miR-145通过作用于mRNA 3′非翻译区下调YTHDF2的表达从而抑制HCC细胞增殖的机制。
亮点
1、通过靶基因找其上游调控的microRNA。
2、通过正反挽救实验证明了miR-145及其靶基因YTHDF2对mRNA的M6A水平的影响。
3、建立了miR-145通过作用于mRNA 3′非翻译区调控YTHDF2的模型。
研究思路
1、IHC验证YTHDF2基因在HCC组织中高表达
2、生物信息学分析预测作用于靶基因的可能的microRNAs:作者通过TargetScan, miRanda和DIANA microT预测到8个microRNAs,并对预测到的microRNAs进行Western Blot和RT-PCR分析,锁定miR-145可能调控YTHDF2基因的表达并利用RT-PCR进行验证。
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