中药复方怎么发高分?高通量测序提分利器 Journal of Proteome Research: 蛋白质组学技术揭示中药复方疏风解毒胶囊治疗急性肺损伤的分子机制

栏目:最新研究动态 发布时间:2018-01-18
在我国,中医药已广泛应用于各种疾病的治疗,如板蓝根和柴胡等。通常,中药复方包括多种类型的中药。一种或几种草药作为君药发挥主要作用......

中药复方怎么发高分?高通量测序提分利器
Journal of Proteome Research: 蛋白质组学技术揭示中药复方疏风解毒胶囊治疗急性肺损伤的分子机制
 
在我国,中医药已广泛应用于各种疾病的治疗,如板蓝根和柴胡等。通常,中药复方包括多种类型的中药。一种或几种草药作为君药发挥主要作用,其余草药作为臣药,辅助增强君药的作用。单一中药的成分已经相当复杂,更何况多种中药配伍而成的中药复方。长久以来,尽管西方医学非常关注中医药的疗效,但中药复方方面的研究成果却很难再国际顶尖的专业期刊上发表。究其原因无非是有效成分无法确定。那么如何突破这一瓶颈呢?下面这篇文章,可能给我们一些启发。
2017年10月,Journal of Proteome Research在线发表了中药复方疏风解毒胶囊治疗急性肺损伤分子机制的文章“Therapeutic Mechanistic Studies of ShuFengJieDu Capsule in an Acute Lung Injury Animal Model Using Quantitative Proteomics Technology”. 下面我们来看一下这篇文章的研究思路。
首先,作者用UPLC/Q-TOF方法结合串联MS,分析了疏风解毒胶囊的有效成分,鉴定出96个色谱峰,对应94种化合物。为了进一步鉴定疏风解毒胶囊在抗炎过程的有效成分,作者运用NF-kB双荧光素酶报告基因系统,结合PharmMapper及MAS3.0,筛选出潜在的10种抗炎活性物质及潜在的药物作用靶点。然后,作者进一步通过体内试验验证上述靶点。选用SPF级别雄性SD大鼠,分成3组:空白对照组(不做任何处理),模型组(LPS诱导急性肺损伤(ALI)模型,并用生理盐水处理)及治疗组(LPS诱导ALI,并用疏风解毒胶囊治疗)。在处理的第1,3和5天,从三组中随机选取3只大鼠,提取肺组织,进行HE染色及蛋白质组分析。作者应用多维蛋白质鉴定技术(MudPIT)和定量蛋白质组学技术(Label-free quantification),得到了疏风解毒胶囊治疗大鼠ALI的差异表达蛋白数据。通过对差异表达蛋白进行生物信息学分析,明确了AKT1在疏风解毒胶囊治疗大鼠ALI中的核心调控作用,并通过进一步的分子生物学方法,验证了多条免疫与炎症相关信号通路参与疏风解毒胶囊治疗ALI的调控过程。
研究路线
 
 
实验结果如下
 
 
图一,研究流程图
 
图二,全蛋白质组分析ALI模型肺组织经疏风解毒胶囊处理后的蛋白质组变化并通过分子生物学方法验证
 
图三,全蛋白质组分析ALI模型巨噬细胞经疏风解毒胶囊处理后的蛋白质组变化
 
图四,疏风解毒胶囊处理后巨噬细胞中重要差异蛋白的分子生物学验证
 
图五,疏风解毒胶囊治疗ALI的分子机制预测

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