大鼠主动脉平滑肌细胞 RASMC

   血管平滑肌细胞在血管疾病研究中起到重要作用，并且可以被用来界定治疗动脉疾病新的治疗靶标。

   RASMC是从大鼠主动脉分离得到的，原代冻存，冰冻运输。每管细胞密度超过5×10^5/ml。细胞特性经α-平滑肌肌动蛋白和肌间线蛋白免疫荧光鉴定。本细胞经检测不含支原体、细菌、酵母菌和真菌。如采用ScienCell实验室提供的实验条件，可保证此细胞5倍增增殖。

   方法取SD大鼠胸、腹主动脉,用酶液Ⅰ(木瓜蛋白酶等)、酶液Ⅱ(胶原酶和透明质酸酶等)酶解分离平滑肌细胞,酶液Ⅰ、Ⅱ的消化时间分别选取10、15、20、25、30 min,并两两组合以确定最佳消化时间。分离的细胞经台盼蓝染色测定其活性并通过平滑肌特异性α-肌动蛋白(α-actin)免疫组化染色鉴定。结果分离的平滑肌细胞在倒置显微镜下计数,酶液Ⅰ、Ⅱ的消化时间分别在30、15 min时平滑肌细胞数量最多为(18.3±1.5)个/低倍视野,与其他各时间点组合相比,差异有统计学意义(P<0.05)。镜下观察典型的平滑肌细胞呈长梭形,细胞膜完整,边缘光滑;台盼蓝染色,90%以上的细胞为活细胞;免疫组化染色鉴定为平滑肌细胞。结论酶消化法分离获取SD大鼠平滑肌细胞方法简单、成本低,采用本法可获得较大量的平滑肌细胞供实验使用。