测序在手，文章我有

肺鳞状细胞癌（lung squamous cell carcinoma ，LUSC）是非小细胞肺癌的主要亚型之一，而非小细胞肺癌占所有人类肺癌的80-85%。circRNA被鉴定为多种癌症中的重要调节因子，但在LUSC中尚未见报道。于是，这篇影响因子11.878、以测序为基础展开研究的文章应运而生。

研究思路如下：


一、circTP63 is upregulated in LUSC. 测序发现circTP63在LUSC表达上调.

1.通过对测序结果进行分析及实验验证，选定circTP63为研究对象

2.在35对临床样本中进行验证

二、Characteristics of circTP63 in LUSC cells.分析circTP63序列

1. 分析circTP63序列

2. 检测细胞系中circTP63的表达，选定SW900、H1703用于功能缺失实验， H226、H2170用于功能获得实验

三、circTP63 promotes cell proliferation and tumor growth. circTP63促进细胞增殖和肿瘤增长
   细胞实验：

1. 干扰 circTP63，抑制细胞生长

2. 过表达circTP63,提高细胞活力

3. 挽救实验，表明circTP63的确可以促进细胞增殖

   体内实验：
  利用H2170建立裸鼠异种移植模型，发现circTP63促进肿瘤生长。

四、circTP63 facilitates cell proliferation by targeting FOXM1.circTP63通过FOXM1促进细胞增殖

1. circTP63、mRNA共表达模式分析，得到25个可能的靶标mRNA，其中FOXM1，KIF18B和BRCA1相关性位居前三

2. 对测序结果进行分析，发现FOXM1在LUSC中显著上调

3.  在35对临床样本中验证FOXM1的表达，并检测circTP63与mRNA表达的相关性，最终，选定FOXM1为主要候选目标。

五、circTP63 relieves repression of miR-873-3p on FOXM1.circTP63具有ceRNA功能通过预测选定miR-873-3p后，利用荧光素酶报告系统、免疫沉淀进行验证。

六、CENPA and CENPB are regulated by circTP63 through FOXM1.circTP63通过调控FOXM1进而调控CENPA/B，促进细胞增殖

1. 过表达circTP63，检测8个候选基因表达水平发现，CENPA，CENPB， CCNB1受circTP63调节

2. 干扰FOXM1，circTP63对CENPA和CENPB的作用显著减弱

3.敲除CENPA和CENPB同时过表达circTP63,circTP63对细胞增殖的促进作用降低
 
综上所诉，circTP63作为ceRNA调控FOXM1，促进肺鳞状细胞癌的发展。